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Convocatoria para la recepción de artículos

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CONVOCATORIA

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1er Edición

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REVISTA

Estamos muy felices de compartir con ustedes nuestro nuevo proyecto para enriquecer los conocimientos en el área del Laboratorio Clínico.

¿Quieres formar parte? Es muy sencillo.

Convocatoria para la recepción de artículos

Edulabc te invita a participar en la redacción de textos, para ser publicados en la revista conforme a los siguientes criterios: 

  • Objetivo general: Divulgar el quehacer académico y tecnológico en un espacio de publicación digital. 
  • Objetivo particular: Fomentar el conocimiento del personal del laboratorio Clínico.
Estructura interna de la revista

Ejes de conocimiento

Diversas disciplinas del laboratorio clínico

Evaluación de Textos

El Comité Editorial procederá a realizar la selección de trabajos que cumplan con las normas de la redacción y presentación de las colaboraciones.

En el proceso de evaluación el Comité Editorial se encargará de:
  1. Confirmar a los autores la recepción del artículo, en un lapso máximo de 10 días hábiles. 
  2. Los artículos se revisarán por expertos en la temática presentada y pueden ser externos o internos a la organización.
  3. Informar al autor el dictamen a su colaboración (aceptación, modificación o rechazo), en un lapso máximo de un mes, a partir de la fecha de recepción. 

Notas aclaratorias: 

  1. La revista Edulabc no tiene fines de lucro, por lo que las colaboraciones no serán remuneradas
  2. Los trabajos se recibirán hasta el día 18 de Noviembre del 2019
  3. La revista no se compromete a publicar todas las colaboraciones recibidas, ni a regresar los originales.
  4.  El contenido de las colaboraciones que se publican en esta revista son responsabilidad total del autor y no necesariamente representan la opinión de la revista.
  5.  Cada autor/a puede presentar un máximo de dos trabajos de investigación por edición, en caso de ser aceptados no se publicarán de manera simultánea. 
  6. Cada trabajo de investigación podrá tener un máximo de cuatro autores.

En caso de aceptación:

  1. Si el artículo requiere modificaciones, será devuelto al autor/a para que estas se realicen, en un lapso menor a un mes. 
  2. Hechos los cambios solicitados, se procederá a la verificación de estos y en caso de cumplir con los requerimientos se edita la colaboración.
  3. Hechos los cambios solicitados, se procederá a la edición de la colaboración. 
  4. La publicación de las colaboraciones se harán de acuerdo a los criterios de la revista.
  5. El artículo podrá ser publicado en el portal de Edulabc para fines educativos.

La dirección electrónica a la que debe enviar sus artículos es: 

revistaedulabc@edulabc.com.mx

¡Gracias!

Tinción de Wright

Breve historia

Fue desarrollada por el patólogo James Homer Wright en 1902 a partir de modificación de la ya existente tinción de Romanowsky, utilizada para diferenciar elementos formes de la sangre.

¿Qué más hay sobre la tinción de Wright?

Es la tinción más empleada en frotis de sangre periférica o de médula ósea. Está clasificada como tinción policromática, ya que tiñe compuestos básicos y ácidos de las células.

De que está compuesto el reactivo de Wright

¿Por qué se tiñen las células de esa manera?

El colorante BASICO (azul Metileno) se une a los componentes ácidos de las células, ácidos nucleicos, gránulos en neutrófilos y proteínas acidas.

Mientas que la Eosina (colorante acido) se une a la hemoglobina, componentes básicos de las estructuras celulares y los gránulos de los eosinófilos.

 

Y ¿ como se ven las células?

¿ como se hace la tinción?

1.- Cubrir el frotis sanguíneo con el colorante de Wright por un tiempo de 1-3 minutos.

2.- Cubrir la preparación con una solución buffer de fosfato (pH: 6.8-7.2) por un tiempo de 3 minutos o más, mezclar suavemente hasta formarse un brillo metálico en la superficie de la preparación (“basura” verde).

3.- Lavar a chorro de agua (pH neutro) la preparación y dejar secar el frotis al aire.

Nota: los tiempos pueden varia de acuerdo al colorante que se esté utilizando.

 

Tinción de Gram

Fue desarrollada en 1884 por un científico danés Hans Christian Gram.

Desde hace varios años esta tinción es una herramienta básica y fundamental dentro del área de la microbiología.

Es considera como una tinción diferencial ya que se clasifica a las bacterias en dos grandes grupos:

  • Gram positivas
  • Gram negativas

Esta tinción se basa en las características de la pared celular presente en las bacterias, la cual posee propiedades diferentes y determinantes en cada microorganismo.

Esta tinción se basa en las características de la pared celular presente en las bacterias, la cual posee propiedades diferentes y determinantes en cada microorganismo.

La pared celular de las bacterias Gram negativas está constituida por:

  • Membrana celular externa
  • Peptidoglicanos (capa fina)

A su vez la pared celular de las bacterias Gram positivas está conformada por:

  • Peptidoglicanos

No cuenta con membrana celular externa

Así pues, la composición química y el contenido de peptidoglicano es la pared celular de las bacterias Gram negativas y Gram positivas explica y determina las características tintoriales.

Procedimiento para realizar la tinción de Gram

Para realizar la tinción de Gram es necesario contar con los siguientes colorantes:

  1. Cristal Violeta
  2. Lugol
  3. Alcohol-acetona
  4. Safranina

 

  1. Cubrir la preparación (previamente realizada) con colorante cristal violeta por un tiempo de 1 minuto, enjuagar a chorro de agua.
  2. Colocar en la preparación Lugol por el tiempo de 1 minuto, enjuagar.
  3. Agregar alcohol- acetona y enjuagar inmediatamente (decoloración).
  4. Añadir Safranina a la preparación por el tiempo de 1 minuto, enjuagar a chorro de agua.

¿Qué sucede en la tinción de Gram?

  1. El cristal violeta tiene afinidad a los peptidoglicanos presente en la pared bacteriana.
  2. El Lugol funge el papel de mordiente (fijador de color) e impedirá la salida de cristal violeta mediante la formación de un complejo cristal violeta-yodo que satura los espacios del péptidoglicano presente en la pared bacteriana.
  3. .El alcohol-acetona, se encarga de deshidratar la pared bacteriana y cierra los poros de la misma, también destruye la membrana externa (presente en las bacterias Gram negativas), debido a que esta es soluble a la acción de disolventes orgánicos, como lo es la mezcla de alcohol-acetona. Cabe señalar que las bacterias Gram positivas, al contener una mayor cantidad de pétidoglicano en comparación a las bacterias Gram negativas, retiene con mayor fuerza el complejo (cristal violeta-yodo antes mencionado)
  4. La safranina es un colorante secundario o de contra tinción el cual se encarga de teñir las bacterias que no pudieron retener el complejo cristal violeta-yodo.

Zonas de venopunción

Brazo

Dentro del laboratorio de análisis clínicos, se manejan diferentes tipos de muestras biológicas, entre ellas encontramos la sangre.

La venopunción es el procedimiento mediante el cual se obtienen la muestra de sangre, para posteriormente ser analizada, y poder emitir un resultado ara facilitar el diagnostico o seguimiento del estado de salud del paciente, pero…

¿Recuerdas como se llaman, y cuales son las venas del brazo de donde se recolectan comúnmente las muestras de sangre?

A continuación, te las presentamos:

 

Anticoagulantes utilizados en el laboratorio clínico

Anticoagulante

Es una sustancia endógena o exógena que infiere o inhibe la coagulación de la sangre, creando un estado antitrombótico.

Tipos de anticoagulantes

  1. Anticoagulantes de acción directa: aquellos que, al interactuar con otras proteínas, alteran la cascada de coagulación.
  2. Anticoagulantes de acción indirecta: son aquellas que inhiben la cascada de coagulación por si solos, sin la dependencia de ningún otro elemento.

Principalmente se utilizan 3 anticoagulantes

  • Ácido etilendiaminotertraacético (EDTA)
  • Citrato de Sodio
  • Heparina

Ácido etilendiaminotertraacético (EDTA)

El EDTA es el anticoagulante mas empleado para los recuentos celulares y estudios morfológicos de células hemáticas.

Se puede encontrar en dos formas:

  1. Disódica (aplicado por aspersión en las paredes de los tubos).
  2. Tripotasica (liquido)

La forma dipotásica (K2) esta recomendada por el Consejo Internacional para la estandarización de la hematología para el conteo de células y determinación de su tamaño.

Fundamento de EDTA

Actúa como quelante (secuestrante) de Ca++, el cual desempeña un papel muy importante para que se lleve a cabo el proceso de coagulación, impidiendo así la formación de fibra.

 

Heparina

La heparina es un anticoagulante utilizado para diversas determinaciones dentro del laboratorio clínico.

Se trata de una molécula con varios grupos sulfato (los cuales proveen a la molécula con varias cargas negativas) además de estar compuesta por una cadena muy larga de azucares, (los cuales dan la capacidad de interactuar con las proteínas que se asocian al proceso de coagulación).

Se puede encontrar en 2 formas:

  1. Heparina de sodio (aplicado por aspersión en las paredes de los tubos)
  2. Heparina de Litio (aplicado por aspersión en las paredes de los tubos)

Ambas presentaciones de Heparina se pueden utilizar para realizar determinaciones en la cuales se requiere plasma.

Por otro lado, la Heparina de Litio también se puede utilizar para procesar muestras de química clínica, electrolitos y amonio.

Fundamentos de la Heparina

La heparina potencializa la formación de complejos entre la antitrombina III y proteasas de serina: Ixa, IXa y Xia (sustancias que desempeñan un papel muy importante en la formación de coagulo) evitando así la formación del coagulo.

 

Citrato de Sodio

La solución de citrato trisódicodihidratado, se utiliza para la obtención de “plasma citratado” el cual es utilizado en pruebas de coagulación sanguínea.

Es posible encontrar citrato de sodio al 3.2 % y 3.8%.

El citrato de sodio al 3.2% ha sido usado en varios estudios de elaboración de calibradores internacionales de referencia por lo que, a dicho porcentaje, es de utilidad para obtener valores de INR (International Normalized Ratio por sus siglas en inglés) más confiables comparados con los tubos de citrato de sodio 3.8%, ya que estos últimos presentan valores alto de INR en muestras de pacientes que reciben terapia oral de anticoagulantes.

Fundamento del citrato de sodio

El citrato de sodio se une al calcio (Ca++) presente en la sangre, provocando que desaparezcan los iones de calcio del plasma y evitando así la coagulación sanguínea.

Técnicas de aislamiento bacteriológico

Técnica del agotamiento de asa

En una placa con agar nutritivo y tocando con suavidad la superficie del medio, extender la muestra siguiendo el esquema de la figura

El recorrido del asa debe ser lo mas largo posible con el fin de conseguir al final del mismo células aisladas que darán lugar a colonias.

Técnica de las estrías escocesas

El procedimiento es igual al del agotamiento de asa, pero la muestra de cultivo se siembra siguiendo el esquema de la figura

Después de realizar la primera descarga se cierra la placa y se flamea al asa, sin cargarla de nuevo, se gira la placa unos 45° y arrastrando del final de las estrías realizamos la segunda fase de las mismas, se repite el procedimiento dos veces mas hasta la ultima estría que finaliza con un pequeño agotamiento en el centro de la superficie del medio cultivo.

 

Tipos de hemólisis

Muchos microorganismos son capaces de crecer en agar sangre y cuando lo hacen responden de diferente manera según realicen o no la lisis de los glóbulos rojos (hemólisis) producida por la acción de una enzima llamada hemolisina.

Podemos diferenciar tres tipos de hemólisis:

 Hemólisis alfa: es una hemólisis parcial y la zona de crecimiento aparece rodeada de un halo de color verdoso.

Hemólisis beta: en este caso la hemólisis es total y el halo que rodea a las colonias es totalmente transparente.

Hemólisis gamma (no hemólisis): el microorganismo en cuestión no es capaz de realizar la hemólisis y por tanto no existe halo alrededor de la colonia.

Caso clínico – Cálculos Renales

Compartimos un caso que nos hizo llegar  el químico Daniel Arias López , agradecemos mucho su aporte.

Paciente refiere haber arrojado cálculos renales, el químico se dio a la tarea de investigar su origen y se encontró con lo siguiente:

Cálculos renales de Weddellita (oxalato de calcio dihidratado). Fotografías realizadas con luz ordinaria y luz polarizada.

Daudon et. al(2012), mencionan que los cálculos de Weddellita del tipo II grupo A, presentan superficie espiculada, la cual esta compuesta por agregados de cristales bipiramidales con ángulos y bordes afilados, cuyo color es amarillo pardo.

De la misma manera, es importante señalar que todo esto se origina a partir de una agregación cristalina, la cual es producida por la atracción electrostática que va en función con la carga de la superficie de los cristales, entre mayor sea esa fuerza de unión más complejo será el agregado, por lo que con el tiempo dará origen a una aglomeración cristalina, hasta concluir con la formación del cálculo.

 

Referencias:

Michael Daudon, Oliver traxer & Paul Jungers. Lithiase Urinaire. 2° edición, Editorial Lavoisier (Medicine Sciences Publications). 2012 Paris, Francia. Pag. 59

Parasitosis

Parásito

Es un organismo que vive sobre un organismo huésped o en su interior y se alimenta a expensas del huésped.

Hay tres clases importantes de parásitos que pueden provocar enfermedades en los seres humanos:

  • Protozoos
  • Helmintos
  • Ectoparasitos

Protozoos

Son organismos unicelulares microscópicos que pueden ser de vida libre o de naturaleza parasiatria.

La transmisión de protozoos que viven en el intestino humano a otro ser humano generalmente ocurre por la vía fecal-oral (por ejemplo, alimentos o agua contaminados o contactos de persona a persona).

Los protozoos que viven en la sangre o tejidos humanos se transmiten a otros seres humanos mediante un artrópodo vector (por ejemplo, por la picadura de un mosquito o jején).

Los protozoos infecciosos para los seres humanos pueden clasificarse en cuatro grupos según su modo de movimiento:

  1. Sarcodinos, amebas, p. ej. Entamoeba
  2. Mastigóforos o flagelados, p. ej., Giardia, Leishmania
  3. Cilióforos o ciliados, p. ej., Balantidium
  4. Esporozoos, organismos cuya etapa adulta no es móvil, p. ej. Plasmodium, Cryptosporidium.

Características generales

  • Organismos unicelulares eucarióticos.
  • La clasificación tradicional, se basa en las estructuras de locomoción.
  • Su tamaño oscila entre 2-200 µm.
  • Presentan núcleo(s), diversos organelos y citoesqueleto.
  • La mayor parte son móviles y heterótrofos
  • Su reproducción, asexual o sexual, puede ser sencilla 8division binaria) o compleja (esquizogonia, merogonia, gametogonia, esporogonia).

 

Phylum Sarcomatigophora:

Subphylum Mastigophora

Utilizan flagelos como medio de locomoción, cada uno de ellos esta formado por un filamento (axonema).

Subphylum Sarcodina

Emiten diferentes tipos de seudópodoscomo medio de locomoción, lo cual les da la forma “ameboidea”. Presentan uno o varios núcleos en los diferentes estadios de vida. El ejemplo representativo es Entamoeba histolytica.

 

Phylum Ciliopora

Los ciliados poseen dos calses de núcleos: macronucleo (poliploide), implicado en la reproducción de RNA mensajero y mocronucleo (diploide), relacionado con la reproducción sexual. El movimiento de los organismos incluidos en este grupo es mediante cilios, son los mismos componentes proteicos que los flagelos. Se reconoce a Balantidium coli como patógeno para el humano.

Phylum Apicomplexa

Se han nombrado, a la fecha, mas de 6,000 apicomplexos, pero los datos obtenidos de muestras ambientales sugieren que puede haber millones de especies dentro de este phylum.

Estos organismos se caracterizan por la presencia de un complejo apical, compuesto por micronemas, roptrias, 1 o 2 anillos polares electrodensos y, en algunas especies, un conoide dentro de los anillos. La estructura general de un apicomplexo varía entre los diferentes grupos. Las formas móviles se desplazan por deslizamiento, aunque se contemplan otros mecanismos.

Sus ciclos de vida son complejos y contemplan reproducción asexual (esquizogonia, merogonia) y asexual (gametogonia). Los esporozoítos, forma infectiva, penetran en las células hospederas, sufren cambios y se reproducen en la forma de merozoitos, algunos de los cuales se transforman en células sexuales, los gametocitos, y pasan finalmente por una fase de esporogonia, que da lugar a las formas infectantes.

Algunos miembros del phylum requieren de un hospedero intermediario (entre ellos, Plasmodium, Taxoplasma Babesia, Theileria), y otros mantiene un estilo de vida monoxeno, con estadios de desarrollo asexual y sexual en un solo hospedero (ejemplos: Toxoplasma e Eimeria).

 

 

Reino Chromista, Subphylum Opalinata

Dentro de la calse de Blastocystea, se incluye a Blastocystis sp.

Protozoos no patógenos

En la lista del CDC, se contemplan:

  • Chilomastix mesnili
  • Endolimax nana
  • Entamoeba coli
  • Entamoeba dispar
  • Entamoeba hartmanni
  • Entamoeba polecki
  • Lodamoeba bütschlii

Nota: cabe señalar que estos microorganismos pueden generar infecciones en pacientes en condiciones de inmunosupresión, por lo que deben de tomarse en cuenta cuando se encuentra la presencia de los mismos y además se presenta sintomatología

Helmintos

Son organismos grandes por lo general se observan a simple vista cuando son adultos, pueden ser de vida libre o de naturaleza parasitaria.

En su forma adulta, los helmintos no pueden multiplicarse en los seres humanos. Hay tres grupos importantes de helmintos (helminto deriva de la palabra griega para “gusano”) que son parásitos humanos:

  • Gusanos planos (platelmintos): incluye los trematodos (duelas) y cestodos (tenias).
  • Gusanos de cabeza espinosa (acantocéfalos): las formas adultas de estos gusanos residen en el tracto gastrointestinal.
  • Gusano cilíndrico (nematodos): las formas adultas de estos gusanos pueden residir en el tracto gastrointestinal, la sangre, el sistema linfático o tejidos subcutáneos.

Ectoparásitos

Pueden incluir en un sentido amplio a los artrópodos hematófagos, como los mosquitos (porque dependen de la sangre de un huésped humano para alimentarse y sobrevivir), este término suele tener un sentido mas restringido que se refiere a organismos como garrapatas, pulgas, piojos y ácaros.

Los artrópodos son de por si causantes importantes de enfermedades, pero son aun mas importantes como vectores o transmisores de muchos patógenos diferentes que, a su vez, producen una enorme morbilidad y mortalidad por las enfermedades que provocan.

Medios de cultivo

Un medio de cultivo es un sustrato o solución de nutrientes en los que crece y se multiplican los microorganismos en el laboratorio, con el objeto de aislar diferentes especies bacterianas, con el din de identificarlas y realizar estudios complementarios.

Clasificación

Pueden clasificarse según su:

  • Consistencia
  • Origen
  • Composición
  • Utilización

Consistencia

  • Líquidos: contienen nutrientes a los cuales se les adicionan sustancias con la capacidad de mantener estables un pH, entre ellos podemos encontrar el caldo nutritivo y caldo peptona.
  • Solidos: se obtienen agregando agar (sustancia de tipo polisacárido que se obtiene de algas marinas) a un medio liquido determinado. Al tener un medio sólido, nos facilita obtener colonias bacterianas aisladas.
  • Semisólidos: similares a los medios sólidos, la única diferencia es que a estos se les disminuye la cantidad de agar, lo que permite conservar cepas bacterianas y la observación y registro de bacterias móviles.

Origen

Según su origen los medios de cultivo se dividen en medios sintéticos y medios naturales.

  • Los medios sintéticos o químicamente definidos son medios compuestos por productos químicos conocidos y se utilizan para realizar estudios metabólicos, por ejemplo: agar blando, caldo nutritivo, agar eosina azul de metileno, etc.
  • Los medios naturales o químicamente no definidos son aquellos medios que se preparan a partir de sustancias naturales animales o vegetales, por ejemplo: suero, leche, papa, etc.

Composición y utilización

Según su utilización y su composición los medios de cultivo se pueden clasificar en:

  • Simples
  • Enriquecidos
  • Selectivos
  • Diferenciales
  • Enriquecimiento

 

  1. Medios Simples
  • Poseen los requisitos nutricionales para permitir el desarrollo bacteriano general, ejemplos: agar nutritivo, caldo nutritivo, entre otros.

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  1. Medios enriquecidos
  • Son medios simples o comunes, a los que se le añaden ciertos elementos como sangre, suero, líquido ascítico, huevo, glucosa, vitaminas, etc. lo que permite el aporte de factores de crecimiento o sustancias que neutralizan agentes inhibidores del crecimiento en bacterias exigentes nutricionalmente, entre algunos ejemplos: agar sangre, medio de Löwenstein-Jensen, enriquecido con huevo para facilitar el crecimiento de Mycobacterium; agar desoxicolato-lactosa (DLA), enriquecido con lactosa y desoxicolato.

 

 

  1. Medios selectivos
  • Se consiguen añadiendo al agar nutritivo compuestos químicos nocivos para algunas bacterias cuyo crecimiento no es de interés o también mediante una alteración de las condiciones físicas del medio, entre algunos ejemplos tenemos
  • El agar Mac Conkey que contiene cristal violeta.
  • Thayer-Martin medio selectivo para Neissar, ya que este posee antibióticos como la vancomicina colistina y nistatina.
  • Caldo lactosado bilis verde brillante en donde la bilis inhibe el crecimiento de bacterias gran positivas.
  • Löwenstein-Jensen con verde de malaquita es selectivo para Mycobacterium.

  1. Medios diferenciales
  • A estos medios se le adiciona sustancias para que solo crezcan ciertas bacterias y estas, al actuar sobre alguna de las sustancias adicionadas, permiten observar macroscópicamente ciertas propiedades de crecimiento que ayudan a diferenciar sus colonas de otras especies diferentes, entre algunos ejemplos encontramos:
  • Agar eosina azul de metileno (EMB), diferencia E. coli (color verde metálico brillante) de colonias de Enterobacter aerogenes (color rosado, consistencia mucosa y crecimiento abundante).
  • Agar sangre, diferencia variedades de Streptococcus pyogenes en Streptococcus betahemolíticos de Streptococcus alfa hemolítico y gama hemolítica.
  • Agar Salmonella-Shigella tiene lactosa y un indicador de pH que permite diferenciar las colonias de bacterias fermentadoras de este disacárido.

  1. Medios de enriquecimiento
  • Son medios líquidos que favorecen o permiten la multiplicación de las bacterias cuando la muestra obtenida es muy pobre, por ejemplo:
  • Caldo tioglicolate, favorece el crecimiento de las bacterias anaeróbicas.
  • Caldo tetrationato favorece crecimiento de bacterias microaerófilas.
  • Los caldos bilis y de Muller-Kauffman, favorecen el crecimiento del género Salmonella.
  • Caldo o agua peptonada se utiliza para el crecimenot de Vibrio Cholerade.

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